Tth pol精製成功!と思ったら落とし穴

先日精製したTth polのPCRにおける増幅活性をチェックしてみたら、Sigma Taqよりむしろ見かけ上は高い活性を示してすごくハッピー。これでコロピーなら1年分をはるかに超える量を確保できたハズ。(20 ulのPCR反応で言えば、2万反応分以上ある。)
と思ったらNiカラムで除去しきれなかったRNAコンタミしていることが判明。PCR用の酵素だからシカトしようかとも思ったが、やはり気持ち悪いので、もう1回Niカラムで精製、と気軽に始めたのがよくなかった。途中でWashのつもりで間違えて溶出液をカラムにどーんと乗せてしまい、せっかく少しずつ慎重に洗浄してきたカラムから、酵素をお漏らししてしまった。PBSで希釈して明日またクロマトをやり直そう。夜が更けて注意力が散漫になった…